Generar una plataforma tecnológica para el incremento del valor genético en el ganado bovino a través de la selección no invasiva de embriones producidos in vitro a partir de parentales seleccionados genéticamente

- Producir embriones in vitro a partir de genética materna y paterna seleccionada. Una vez iniciado el proyecto, las empresas asociadas seleccionarán hembras que cumplan con características genéticas deseadas por dichas empresas. Estas hembras serán usadas como donantes. Las hembras serán clasificadas según su edad en vaquillas y vacas para realizar dos grupos de trabajo y determinar el efecto de la edad materna sobre la eficiencia de producción de embriones in vitro según la metodología descrita. Se usará semen comercial suministrado exclusivamente por American Breeders Services (ABS) con características deseadas en base al valor genético calculado por la empresa en sus test de progenies. Los ovocitos (gametos femeninos) serán obtenidos de las vacas seleccionadas, mediante punción folicular in vivo (OPU), garantizando la colecta al menos una vez por semana para la intensificación de la producción de embriones de cada hembra donante. Los embriones se producirán in vitro en sistemas de cultivo definidos para la colecta de las vesículas extracelulares para posterior análisis.' - Establecer un sistema de clasificación embrionario no invasivo integral compuesto por dos niveles: 2.1. En base a criterios morfológicos estándares (primera clasificación) Al día 7.5 de desarrollo se realizará una primera clasificación de los embriones producidos in vitro en base a características morfométricas usaría yo del blastocisto, definido en el modelo matemático de selección. Las variables consideradas para esta selección serán evaluadas o medidas al día 7.5 de desarrollo (D7.5) (post fertilización in vitro) y son: a) estado de desarrollo (ED) ((blastocisto temprano (5), blastocisto (6), blastocisto expandido (7) y blastocisto protruyendo (8)) y b) calidad del blastocisto (CB): 1: excelente calidad, buena expansión, macizo celular interno y trofoblastos bien definidos, sin signos de degeneración; 2: buena calidad, estructuras bien formadas y presencia de pocas células desprendidas y 3: estructuras irregulares y muchas desprendidas o degeneradas. Para esta primera clasificación no se considera el diámetro pero esta variable se requiere para la segunda clasificación. Como punto de partida se considerarán de competencia superior (aptos para transferencia), solo aquellos que cumplan con los criterios morfológicos aceptados para transferencia según la sociedad internacional de tecnologías de embriones (IETS): criterio: ED 6-7; CB 1-2. En este objetivo se evaluará el porcentaje de embriones con estas características que son producidos de los animales seleccionados en el objetivo 1. Todos los embriones calidad transferible (competentes según la primera clasificación), serán vitrificados hasta el momento de la transferencia a una hembra receptora. Se determinará la eficiencia de producción de embriones transferibles por receptora y por grupo etario según la primera clasificación. 2.2. En base al modelo matemático (segunda clasificación) El modelo matemático propuesto incluye las características morfológicas estándares o tradicionales descritas en el objetivo anterior y el diámetro del blastocisto (D7.5) y además las características de las vesículas extracelulares (EVs) secretadas por el embrión al medio de cultivo durante el proceso de blastulación (D5-D7.5). Al día 7.5 de desarrollo, se colectará el medio de cultivo de todos los blastocitos (individuales) seleccionados y clasificados en el objetivo 2. Se determinará, mediante mapeo de nanopartículas (NTA), las características de las poblaciones de las EVs, expresadas en descriptores estadísticos de talla (media del diámetro) y concentración. Se analizarán al menos 150 embriones (con sus respectivos medios de cultivo). El análisis con el modelo permitirá realizar una segunda clasificación binaria de los embriones en: competentes (numeral 1) y no competentes (numeral cero). Se determinará la eficiencia de producción de embriones competentes por receptora y por grupo etario según la segunda clasificación.