Desarrollar kits comerciales para evaluar la respuesta inmune innata y adaptativa de peces en ecosistemas dulceacuícolas.

Desarrollar un kit para evaluar la respuesta inmune innata mediante lacuantificación de citoquinas.Desarrollar un kit para la evaluación de la respuesta inmune adquirida mediada por linfocitos T CD4, utilizando anticuerpos policlonales.Desarrollar anticuerpo monoclonal para evaluar la respuesta inmune adquirida mediada por linfocitos T CD8.Llevar a formato comercializable el anticuerpo monoclonal antiCD8 .

Los peces en cultivo están constantemente amenazados por innumerables patógenos que afectan directamente la productividad. La búsqueda de soluciones por parte de la industria farmacéutica y de alimentos de truchas y salmones se traduce en un desarrollo cada vez mayor de vacunas, fármacos e inmunoestimulantes, con una variada oferta de productos que mueve grandes cantidades de recursos. Sin embargo, las vacunas otorgan una protección que fluctúa entre el 40% y 70% en el mejor de los casos, y no existen las herramientas apropiadas y suficientes para evaluar su efectividad en cuanto al tipo de inmunidad que inducen o debieran inducir para proteger, limitando por tanto el desarrollo de estrategias de mejoramiento. Las vacunas son evaluadas por los niveles de protección que inducen frente a un desafío con el patógeno (sobrevivencia) y/o mediante la determinación de anticuerpos totales o neutralizantes. Este tipo de evaluación es parcial porque no se evalúan los efectos sobre la inmunidad celular, que incluyen los mecanismos fundamentales para lograr protección de los individuos y no permite realizar mejoras basadas en el conocimiento de estos mecanismos de protección. En este proyecto se propone desarrollar kits basados en la cuantificación de citoquinas y en la producción de anticuerpos específicos de linfocitos T de salmónidos para evaluar la respuesta inmune innata y adaptativa en los peces de ecosistemas dulceacuícolas. Estos kits serán utilizados para evaluar la inmunidad desarrollada por vacunas disponibles en el mercado. En particular, se propone: (i) desarrollar un kit para evaluar la respuesta inmune innata mediante la cuantificación de citoquinas, (ii) producir un kit para la evaluación de la respuesta inmune adquirida mediada por linfocitos T CD4, utilizando anticuerpos policlonales, (iii) desarrollar anticuerpo monoclonal para evaluar la respuesta inmune adquirida mediada por linfocitos T CD8 y (iv) llevar a formato comercializable un anticuerpo monoclonal dirigido contra linfocitos T CD8+. La estructura de los ejecutores de esta propuesta es clave para concretar la generación de valor del conocimiento científico: un grupo de investigadores expertos en inmunología dedicados al estudio de la inmunidad en peces y una empresa prestadora de servicios de análisis molecular, comprometida desde hace más de 10 anos con el desarrollo tecnológico en la industria de la salmonicultura.La propuesta se proyectó a 2 anos con el fin de obtener en este periodo los siguientes productos: un kit comercial para evaluación de la respuesta inmune innata de uso en salmones y truchas, un kit comercial para evaluar la respuesta inmune celular (adquirida) mediada por linfocitos T CD4 en salmones y truchas, un método para evaluar la respuesta inmune mediada por linfocitos T CD8+ (citotóxicos), un anticuerpo monoclonal anti-CD8 comercializable para evaluar respuesta mediada por linfocitos T citotóxicos de salmones y truchas. El costo total es de $ 225.272.400 que corresponden a $ 142.010.000 (63%) solicitados a FIA, $ 20.000.000 (8,9%) de aporte pecuniario de los ejecutores y $ 63.262.400 (28,1%) de aporte no-pecuniario de los ejecutores.