Desarrollar, optimizar e implementar la técnica de PCR en Chile para el diagnóstico del virus PRRS en planteles porcinos.

Optimizar la técnica de PCR para la detección del virus PRRS a partir de cepas controles, basándose en los métodos descritos previament;Desarrollar la técnica de PCR para la detección del virus PRRS a partir de muestras provenientes de cerdos faenados (muestras de tejidos)Desarrollar la técnica de PCR para detección del virus a partir de muestras provenientes de cerdos vivos (muestras de sangre, suero o plasm. Comparar y evaluar a nivel de campo el uso de análisisinmunológicos y moleculares para el diagnóstico del virus PRRS.

El sector porcino se ha visto enfrentado a una gran competitividad tanto nacional como internacional, por lo que los productores han realizado grandes esfuerzos por mejorar sus parámetros productivos, optimizándolos considerablemente. Sin embargo, la presencia de enfermedades los afecta seriamente mermando los resultados esperados.La industria porcina se ha caracterizado por mantener un estándar sanitario privilegiado a nivel nacional; sin embargo a pesar de los resguardos, el ano pasado fue notificada oficialmente la presencia del síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRS) enfermedad de carácter exótico que causa grandes estragos en otros países. Dado la reciente introducción del virus, el país no cuenta con técnicas de diagnóstico rutinarias necesarias para realizar una detección precoz, específica y rápida de este patógeno. Sin embargo el SAG pretende realizar un plan de erradicación del virus PRRS que implica el uso de técnicas de diagnóstico molecular. Por esta razón, el objetivo de este proyecto es implementar, optimizar y desarrollar la técnica de Transcripción Reversa (RT) acoplada a la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para la identificación específica de PRRSV en planteles porcinos chilenos.Esta técnica permite diagnosticar el patógeno mediante la amplificación de su genoma y se caracteriza por ser altamente específica, sensible y rápida. El principal inconveniente de esta técnica, dada su alta sensibilidad, es la contaminación entre muestras. Por esta razón, se pretende también adaptar la técnica desarrollada a sistemas automatizados como es el Light Cycler, los cuales no han sido utilizados aún para este virus. Hasta la fecha, en Chile sólo se dispone de un ELISA para la detección de PRRSV, el cual presenta una serie de limitaciones que impiden el diagnóstico certero del virus. Es por esto que en otras partes del mundo cuentan también con la técnica de RT-PCR como un complemento fundamental para el diagnóstico de este virus. Para implementar esta técnica en el país, primero se desarrollará un método de diagnóstico utilizando material no infeccioso como es el ácido nucleico extraído de cepas controles de PRRSV y se obtendrá el mejor protocolo de PCR tradicional. Posteriormente se optimizará para muestras provenientes tanto de cerdos faenados como vivos. Una vez montada la técnica de PCR tradicional se adaptarán los protocolos aprobados al equipo de PCR automatizado Light Cycler. La técnica de RT-PCR se comparará con la técnica de ELISA, con el fin de comprobar las ventajas y desventajas de ambas y de determinar el momento adecuado de la infección en que éstas se deben aplicar, ya sea por separado o juntas. Para esto, se propone implementar la técnica de ELISA también en este proyecto.El resultado final es que los productores cuenten con las herramientas de diagnóstico adecuadas para la detección del virus PRRS en forma específica, sensible y rápida, en todas las etapas del sistema productivo, teniendo con esto la posibilidad de erradicación del virus. Además, podrán obtener una visión real del impacto de esta enfermedad en sus planteles. De esta forma podrán optimizar las medidas de control hasta ahora utilizadas y en un futuro contarán con una técnica que les permitirá mantenerse libres de esta enfermedad, lo que está dentro de los planes de erradicación de este patógeno proyectado por el SAG.. El costo total del proyecto es de $ 130.926.132, de los cuales $ 51.089.351 serán aportados por Diagnotec y $ 79.836.782 serán financiados por FIA.